牛奶是最古老的天然饮料之一,被誉为“白色血液”,对人体的重要性可想而知。而组成人体蛋白质的氨基酸有20种,其中有8种是人体本身不能合成的(婴儿为9种,比成人多的是组氨酸),这些氨基酸称为必需氨基酸。我们进食的蛋白质中如果包含了所有的必需氨基酸,这种蛋白质便叫作全蛋白。牛奶中的蛋白质便是全蛋白。
今天,我们通过实验介绍纯牛奶及酸奶的蛋白质测定方法。
1.实验部分
1.1仪器
N310自动凯氏定氮仪(格丹纳)
DS-360-42H高温石墨消解仪(格丹纳)
1.2试剂与耗材 盐酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,标准滴定液。
硼酸溶液:质量分数 2% 。
氢氧化钠溶液:质量分数 40% 。
溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂:将溴甲酚绿乙醇溶液 (1g/ L) 与甲基红乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 体积比临时混合摇匀备用。
实验中涉及到的试剂,均为优级纯或分析纯;
实验用水为无氨蒸馏水。
催化剂片: 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片
1.3实验过程
1.3.1取样 准确称量2-3g 的样品(精确至0.1mg ),加催化剂一片(或硫酸钾5g 与硫酸铜0.5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL。
1.3.2石墨消解 利用DS-360-42H高温石墨消解仪进行消解,将消解管放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,设定消解温度参数如下表:
消解完,取下消解管并冷却。
1.3.3上机测试 待消解管内溶液冷却至室温后,将消解管放置于N310自动凯氏定氮仪上,开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下:
1.3.4仪器自动滴定并给出计算结果。
2.结果与讨论
采用多孔石墨消解仪可以快速大批量对样品进行消解,比电热板消解速度跟效率都要大大提高,回收率也得到保障,使用凯氏定氮仪测试奶制品中蛋白质含量,结果准确,平行性良好。